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01

4in1 shRNA克隆案例分享

胃癌是侵襲性極強(qiáng)的惡性腫瘤之一，早期診斷率低，轉(zhuǎn)移率高。盡管胃癌在治療方面已經(jīng)取得了一定的進(jìn)展，但為了尋求更佳的治療手段，需要更好地了解其潛在發(fā)病機(jī)制和新的治療靶點(diǎn)。驅(qū)動(dòng)蛋白超家族23基因（KIF23），在細(xì)胞質(zhì)分離、軸突生長(zhǎng)等多種細(xì)胞過程中發(fā)揮重要作用。目前，KIF23已被發(fā)現(xiàn)在多種腫瘤組織和細(xì)胞中高表達(dá)，提示KIF23與腫瘤發(fā)生有潛在的聯(lián)系。在本篇研究，作者發(fā)現(xiàn)KIF23的表達(dá)與胃癌的不良預(yù)后相關(guān)，且與腫瘤分期（pTNM）有關(guān)。體外實(shí)驗(yàn)證明，KIF23的缺失對(duì)胃癌細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用。此外，KIF23基因敲除可顯著抑制小鼠胃癌細(xì)胞的增殖，并顯著下調(diào)腫瘤細(xì)胞增殖因子Ki67和PCNA的表達(dá)。綜上所述，這些數(shù)據(jù)表明KIF23可能是胃癌的一個(gè)潛在治療靶點(diǎn)。

02

shRNA腺病毒案例分享

據(jù)報(bào)道，跨膜蛋白173（TMEM173）重組蛋白能參與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、炎癥和免疫過程，這些過程都與心肌肥大密切相關(guān)。TMEM173和自噬之間有密切而復(fù)雜的聯(lián)系，但它在自噬中的具體作用還有待進(jìn)一步研究。在本文中，作者發(fā)現(xiàn)與野生型C57BL/6小鼠相比，Tmem173基因敲除（KO）的小鼠在橫向主動(dòng)脈縮窄（TAC）6周后表現(xiàn)出更嚴(yán)重的肥大、纖維化、炎性浸潤(rùn)和心臟功能障礙。透射電鏡和蛋白質(zhì)水平顯示KO小鼠心肌自噬小體降解受到抑制。另外，苯腎上腺素處理的乳鼠心肌細(xì)胞的體外實(shí)驗(yàn)表明，Tmem173基因的豐度與Lc3-Ⅱ的豐度和反映自噬體降解能力的紅色和黃色熒光點(diǎn)數(shù)呈負(fù)相關(guān)。這些結(jié)果表明，TMEM173可以改善自噬通量，并對(duì)壓力超負(fù)荷所致的心肌肥厚具有保護(hù)作用，暗示其可能成為未來治療心肌肥厚的潛在靶點(diǎn)。

Tmem173下調(diào)對(duì)體外PE誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大的影響

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03

4in1 shRNA腺病毒案例分享

敲低PFKFB3的表達(dá)可降低成熟破骨細(xì)胞的數(shù)量大小且損壞F-肌動(dòng)蛋白環(huán)

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04

4in1 shRNA慢病毒案例分享

在多種乳腺癌細(xì)胞中敲低USP14的表達(dá)

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05

mir30-based shRNA AAV案例分享

06

誘導(dǎo)性shRNA AAV案例分享

伏隔核神經(jīng)元cAMP調(diào)控血腦屏障完整性和抑郁敏感性

中國(guó)藥科大學(xué)的研究人員通過代謝組學(xué)分析等手段對(duì)壓力應(yīng)激誘導(dǎo)抑郁的小鼠模型進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)cAMP在NAC中特異性降低，并與抑郁程度呈正相關(guān)，在NAC中補(bǔ)充cAMP可以改善BBB的完整性和抑郁樣行為。RNA-Seq分析發(fā)現(xiàn)，cAMP下降主要是因?yàn)槠浜铣擅窤dcy5受抑制，且此過程只發(fā)生在神經(jīng)元細(xì)胞中。通過降低NAc中Adcy5的表達(dá)，內(nèi)源性調(diào)節(jié)神經(jīng)元內(nèi)cAMP合成，可調(diào)節(jié)對(duì)社會(huì)應(yīng)激的敏感性。此外，NAc腦區(qū)cAMP不足降低了胞外基質(zhì)蛋白reelin的表達(dá)，外源補(bǔ)充后促進(jìn)了BBB完整性，并改善了抑郁樣行為。上述結(jié)果表明，神經(jīng)元cAMP可能通過Reelin介導(dǎo)的細(xì)胞外基質(zhì)信號(hào)調(diào)節(jié)NAC血腦屏障完整性的分子機(jī)制，為抑郁癥的防治提供了新思路。

伏隔核內(nèi)神經(jīng)元CAMP合成內(nèi)源性調(diào)節(jié)后的行為變化

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